Autoría principal:
Marta Ayala
Resumen:
La tecnología de ADn recombinante puede emplearse ahora para preparar fragmentos de anticuerpos efectivos en el diagnostico in vivo y en la terapia.
Fueron expresados en bacterias fragmentos Fv de simple cadena (scFv), generados a partir del clonaje y modificación de las regiones variables de los genes que codifican para las cadenas ligeras y pesadas del anticuerpo monoclonal de ratón CB-Hep.1, especifico para el antígeno de superficie del virus de la Hepatitis B (AgsVHB).
Se emplearon la reacción en cadena de la polimerasa, cebadores sintéticos diseñados al efecto y vectores de expresisn construidos con los promotores triptsfano, el piptido señal ompa y el terminador T4. El fragmento "linker" de 14 aminoácidos reportado fue empleado para la unión de las regiones variables ligada (VL) y pesada (VH).
Para ello se extrajo ARn del hibridoma CB-Hep.1 y se preparó cADn de simple cadena por métodos convencionales. Las regiones VH y Vl se ampliaron por PCr empleando cebadores para las zonas FR1 (extremo 5') y constante (extremo 3'), luego de lo cual fueron clonadas en vectores de secuenciacisn y determinadas las secuencias de bases.
El nivel tecnológico alcanzado en esta temática sitúan al país en una posición mundial favorable en el campo de la ingeniería genética de anticuerpos.