(1923 - 1998)
Geógrafo, espeleólogo y arqueólogo. Primer Presidente de la Academia de Ciencias de Cuba, Presidente fundador de la Federación Espeleológica de América Latina y el Caribe y de diversas sociedades científicas nacionales e internacionales.
Ciencias Biomédicas
2011 | Estudios fisiológicos y nutricionales de la E. coli y la combinación novedosa de métodos de separación permiten obtener ADN plasmídico con alta pureza y homogeneidad para su uso en terapia génica.
Autoría principal: Odalys Ruíz, Miladys Limonta
Resumen: El uso de la terapia génica es un procedimiento prometedor para la prevención y tratamiento de numerosas enfermedades. Es por eso que ha motivado un considerable interés en la comunidad científica internacional en la última década. La terapia génica requiere de cantidades considerables de ADN plasmídico que debe cumplir con exigentes parámetros de pureza y homogeneidad. El ADN plasmídico es un producto intracelular por lo que su productividad es proporcional a la densidad celular final alcanzada en un cultivo. Para la obtención de grandes cantidades de biomasa se requiere establecer un proceso de fermentación donde se tenga en cuenta la composición del medio y múltiples factores operacionales que determinan su óptimo crecimiento. El efecto de diferentes componentes del medio, tales como la fuente de carbono y nitrógeno fueron evaluadas para garantizar las necesidades nutricionales del microorganismo. Por otra parte, se estudió la influencia del pH, la agitación y la temperatura sobre el crecimiento celular y la productividad específica en el cultivo. A partir de estos estudios se diseñó un medio de cultivo incrementado definido que permitió alcanzar altas concentraciones celulares y como consecuencia elevar la productividad de ADN plasmídico en la célula, por encima de 1.8 mg ADNp por gramo de biomasa, lo cual se encuentra entre los valores más altos reportados en la literatura científica internacional. Estos estudios permitieron demostrar que la cantidad e integridad físico-química de la molécula obtenida están determinadas por las interacciones entre la célula hospedera, el plásmido y las condiciones ambientales. El material obtenido fue procesado empleando una combinación de dos métodos cromatográficos ortogonales para la eliminación del ARN, proteínas, ADN cromosomal del hospedero y endotoxinas; los cuales constituyen los principales y más complejos contaminantes que deben ser removidos de la preparación final. Este trabajo es el primer reporte que describe el uso de la matriz POROS R1 50 para la purificación de ADN plasmidico grado farmacéutico. El procedimiento diseñado se escaló y a partir del mismo se obtuvo una preparación de ADN plasmidico con alto grado de pureza y homogeneidad molecular, libre de pirógenos, inocua y estéril acorde con los requerimientos internacionales establecidos para este tipo de producto. Este trabajo ha sido publicado en 3 artículos de una reconocida revista internacional y un capitulo de un libro sobre terapia génica (Biopharm International 2010, V23 Número 2; Biopharm International 2009, V7 número 22; Biopharm International 2008, V9 número 21; Gene Therapy, Developments and Future Perspectives, editorial INTECH (ISBN 978-953-307-617-1). También cuenta con la aprobación de la autoridad regulatoria nacional (CECMED) para el empleo del producto obtenido tres ensayos clínicos. Cuenta además con 8 reportes técnicos arbitrados y se ha presentado en 8 eventos internacionales. El trabajo forma parte de 3 tesis de diploma, una tesis de maestría y una tesis de doctorado.