Ce travail décrit le développement d’une nouvelle méthodologie relativement simple et économique pour réussir à  l’isolement et le sequençage de l’extrême C-terminal des protéines.

Ce résultat satisfait aux besoins de nombreux projets dans le domaine de la biologie moléculaire requérant l’identification et la caractérisation de nouvelles protéines obtenues de leurs sources ainsi que la comparaison de leur séquences avec celles des références figurant sur la base de données de séquences établies.

Bien qu’il existe un procédé établi et automatisé pour obtenir la séquence du groupe N-terminal, ce n’est pas le cas de l’extrême C-terminal, où il y a des différences altératives dont la relation avantages/désavantages n’a pas permis d’établir une variante définitive.

Dans la méthodologie proposée, on emploi un anhidride acide sous des conditions de blocage sélectif de la fonction amine des peptides obtenus préalablement par l’action de la trypsine, ce qui génère un mélange de peptides ayant au moins une charge postive sur la’acide aminé basique placé dans l’extrême C-terminal de chaque peptide, excepté le dernier qui doit être un acide aminé neutre. Une telle différence permet d’utiliser une colonne chromatographique à  très bas volume pour séparer ce peptide.

Plusieurs protéines ont été caractérisées telles que le cytochrome C, la myoglobine et quelques protéines recombinantes obtenues au Centre de génie génétique et de biotechnologie (CIGB) comme : la streptokinase, TAB-A et la mucorpepsine, le peptide C-terminal qui en dérive étant analysé par spectrométrie de masse.

C’est pourquoi le résultat proposé est nouveau et représente essentiellement un apport aux connaissances scientifiques dans une branche croissante de la science et de la technologie appliquée à  la génie génétique et à  la biologie moléculaire.

L’apport aux connaisances scientifiques ainsi que la rigueur scientifique pour sa réalisation, ont été des éléments importants sur lesquels s’est basée la décision du comité scientifique de la réunion sur les procédés pour l’analyse des structures, tenu en Allemagne, au sujet de l’inclusion de ce travail dans le livre des résumés de ce congrès, l’un des plus prestigieux dans le domaine des études de la structure des protéines. Une telle sélection démontre l’intérêt et l’accueil de la communauté internationale très spécialisée dans ce thème.